网问答>>为什么琼脂糖凝胶电泳旁边跑没有点样,但是跑出来荧光?
问题
为什么琼脂糖凝胶电泳旁边跑没有点样,但是跑出来荧光?
时间:2024-03-05 16:15:52
左边有三个孔有点样,跑出条带正常。但marker右边孔是没有上样dna的,但是不明白跑出来为什么有条带。marker是100bp的marker。
最佳回答
根据你描述的情况,琼脂糖凝胶电泳旁边跑出了荧光,尽管右侧的marker孔没有上样 DNA,这可能是由于几种可能的情况造成的:1. **污染物导致的:** 有时候琼脂糖凝胶或电泳缓冲液中可能存在荧光物质的污染,这些物质可能会在电泳过程中产生荧光信号,即使没有 DNA 样品存在。2. **交叉污染:** 在电泳前后处理样品的过程中,可能会发生交叉污染,导致其他含有荧光物质的试剂或者容器与电泳凝胶发生接触,从而在凝胶上产生荧光信号。3. **光源反射:** 有时候琼脂糖凝胶可能会在紫外光或者其他光源的照射下产生荧光信号,这可能会导致旁边的凝胶产生荧光,即使没有 DNA 样品存在。4. **其他因素:** 其他因素,比如琼脂糖凝胶的制备过程中出现的问题,可能会导致凝胶本身产生荧光信号。要确定具体原因,可以考虑排除潜在的污染源,如更换试剂、减少样品处理过程中的接触,或者在相同条件下运行空白对照试验。如果问题仍然存在,可能需要进一步调查或者尝试不同的实验条件来解决。
时间:2024-03-05 16:15:55
可能由以下原因造成:1 污染:可能是电泳缓冲液、琼脂糖溶液、核酸样品或其它试剂在制备或操作过程中受到了荧光标记物的污染。例如,使用过含有荧光染料(如EB,SYBR Green等)的液体后未充分清洗容器,导致后续实验 ** 现非特异性的荧光信号。2 泳道边缘渗漏:在点样时,若核酸样品溢出泳道或者在电泳过程中样品发生横向扩散,可能会在泳道边缘形成荧光带。3 染料迁移:如果使用的是一种能在电场作用下迁移的染料,在电泳过程中,即使没有直接点样的地方也可能由于染料在电场中的移动而产生荧光。4 背景荧光:某些情况下,即便没有DNA/RNA存在,染料本身在紫外灯下也可能会有微弱的背景荧光。
时间:2024-03-05 16:15:58
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